谷胱甘肽测试方法

　　谷胱甘肽的检测方法很多，常用的方法有碘量法，DTNB(Ellman试剂)法，硝基铁氰 化钠法，荧光法，四氧嘧啶法和液相色谱法(HPLC)。 以上方法各有优点，检测谷胱甘肽含量时，可以根据实际情况选择合适，灵敏，准确的检测方法。

　　DTNB比色法

　　原理：DTNB与谷胱甘肽的巯基反应生成黄色的5-硫-2-硝基 苯甲酸，在412 nm波长处有一个较大吸收峰，而DTNB在400 nm以上几乎没有吸收峰，向含有谷胱甘肽的样品中加入少量DTNB，测量反应溶液在412 nm处的吸光度，并根据吸光度获得谷胱甘肽含量。

　　方法步骤：

　　1. DTNB存储溶液的制备：将0.01 mol / L DTNB溶解在0.05 mol / L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)中以形成DTNB存储溶液。

　　2. DTNB分析溶液的制备：用0.5 mol / L，pH8.0 Tris-HCl缓冲溶液稀释DTNB储备溶液100倍，制备DTNB分析溶液，在黑暗中保存，准备用于当前使用。

　　3.操作步骤：取0.5 mL谷胱甘肽标准溶液或测试样品溶液(0.1〜3.0 mol / L)，将其加入1.5 mL浓度为0.15 mol / L的NaOH溶液中，然后加入3%甲醛， 溶液为05mL，并在pH 8.0和25℃下反应2分钟，反应后，将0.5mL反应溶液加入到DTNB分析溶液中，在25℃下反应5分钟，并在412nm的波长处测量吸光度，根据两者的吸光度，计算出差异并代入标准曲线以计算谷胱甘肽含量。

　　碘量分析

　　原理：利用谷胱甘肽的还原性与碘酸钾反应，当谷胱甘肽完全反应时，碘酸钾会将碘化钾氧化为碘，碘会使淀粉指示剂变蓝，这是滴定的终点。